期刊简介
本刊是中华外科学会会刊，创刊于1985年，是由中华医学会主办，北京大学人民医院承办的普通外科高级专业刊物，本刊的读者是全国广大高中级普通外科医师、医学院校教师、科研人员、大学生、研究生等。中华普通外科杂志的栏目有专家论坛、论著、短篇论著、技术交流、经验交流、病例报告、讲座、综述、评论、争鸣园地、临床病例讨论等，不定期发布消息、会议征文、科研讨论会纪要，国内外其他学术活动消息等。
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首页>中华普通外科杂志
- 杂志名称：中华普通外科杂志
- 主管单位：普外临床
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-3855/R
- 国内刊号：11-3855/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
转染胸苷磷酸化酶基因联合干扰素α2a增强5'-脱氧氟尿苷对结肠癌细胞株的细胞毒作用
刘奇；王绮雯；张继民；方耿
关键词：结肠肿瘤, 胸苷磷酸化酶, 干扰素α, 氟尿苷
摘要：目的 利用慢病毒载体将胸苷磷酸化酶(TP)基因转染人结肠癌细胞株LOVO,然后应用干扰素-α2a(INF-α2a)处理转染前后细胞,分别测定5'-脱氧氟尿苷(5'-DFUR)和5-氟尿嘧啶(5-FU)对LOVO抗肿瘤效应的影响.方法 构建包含TP基因的慢病毒载体,转染结肠癌细胞株LOVO,以流式细胞技术和免疫荧光法检测在第5代LOVO中的转染效率;加INF-α2a培养24h后分别应用RT-PCR和Wester blot检测细胞的TP mRNA和TP蛋白表达;MTS法检测5'-DFUR和5-FU对各组细胞的半数抑制浓度(IC50);高效液相色谱法检测各组细胞转化5'-DFUR为5-FU的量.结果 转染TP基因的效率达95％.LOVO+INF-α2a组的TP mRNA表达是LOVO组的1.87倍,而LOVO-TP组和LOVO-TP+ INF-α2a组TPmRNA表达则比LOVO组分别增加了18.56倍和59.61倍(P＜0.01).LOVO-TP+ INF-α2a组和LOVO-TP组蛋白表达水平比LOVO组分别增加242.23倍和197.69倍(P＜0.01).5'-DFUR对LOVO-TP组细胞的IC50值仅为LOVO组细胞的37.2％,而LOVO-TP+INF-α2a组的IC50则是LOVO组的18.2％.LOVO-TP组在加入100、200、400 μmol/L5'-DFUR的培养基中检测的5-FU浓度比LOVO组分别增高了26.13％、33.23％、32.95％,而LOVO-TP+ INF-α2a组比LOVO组分别增高了49.94％、61.66％、72.14％. 结论 转染TP eDNA能够明显提高LOVO细胞的TP mRNA及TP蛋白的表达水平,而INF-α2a则进一步增强这种上调作用.增高的TP表达使细胞外5'-DFUR转化为5-FU含量增加,明显提高5'-DFUR的细胞毒性.
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